RAD51は、BRCA2と複合体を形成し、相同組換えに関連するDNA損傷応答経路において中心的な役割を果たしている。RAD51とそのホモログの構造は、原核生物から高等真核生物まで高度に保存されている。BRCA2の変異は数多く報告されているが、RAD51の変異については、ヒトやイヌでは数少ない報告しかされていない。しかし、最近の研究で、イヌのRAD51のいくつかの変異が乳腺腫瘍組織から同定された。これらの変異のいくつかは、ホモオリゴマー化や「Partner and localizer of BRCA2」（PALB2）との相互作用に影響を与えていると思われる。本研究では、犬のPALB2ホモログをクローニングし、RAD51変異体の機能の変化を評価するために、RAD51変異体との相互作用への影響を調べた。RAD51のA209SおよびT225S変異体では、RAD51とPALB2の相互作用が減衰していた。これらの結果から、イヌのRAD51変異体は、DNA損傷に対する相同組換え経路を変化させる可能性があることがわかった。

皮膚および皮下の肥満細胞腫（MCT）は、犬の癌の中でも最も頻度の高い癌の一つに数えられる。しかし、それらの発生の遺伝的病因はまだほとんど知られていない。ただし、皮膚のMCTの半分以下でKITと腫瘍タンパク質p53（TP53）の変異が報告されている。皮下のMCTでは、これまで遺伝子の変化は検出されていなかった。我々は、皮膚および皮下のMCTにおけるKITとTP53の変異を分析し、KITとTP53のプロモーターおよび隣接するエクソン1領域にメチル化されたCpGサイトを同定した。変異解析では、KITのエクソン8、9、11と、TP53のエクソン5～8に焦点を当て、それぞれ26％と7％の皮下MCT症例に変異が見られた。さらに、皮下のMCTにKITの変異が検出された初めての症例を報告します。本研究では、KITエクソン11変異とKiupelおよびPatnaikグレードの高さが生存率の低下と関連していた。イヌの皮下MCTでは、KITとTP53遺伝子はともに一般的にメチル化されていなかった。KITプロモーターとそれに隣接するエクソン1のCpG位置の散発的なメチル化が、皮膚MCTの70.4％と皮下MCTの82％で検出された。TP53プロモーターとエクソン1のCpGポジションの散発的なメチル化は、分析された皮膚のMCTサンプルの36.8％で観察された。2つの皮下MCTにおいてのみ、CpGポジション13または14でKITのメチル化を示すクローンが30％以上観察された。このCpGポジション14は、Sp1転写因子の結合部位と予測されている。しかし、この位置でのKITプロモーターのメチル化の意義については、さらなる評価が必要である。

獣医がん化学療法患者における抗菌薬予防のための絶対好中球数（ANC）のカットオフ値は経験的なものであり、施設によって異なる。エビデンスに基づいたカットオフ値は、特に世界的な抗菌薬耐性の増加に伴い、抗菌薬スチュワードシップには不可欠である。本研究の主な目的は、化学療法を受けた犬における抗菌薬予防のための＜0.75×109/l ANCカットオフの忍容性と、その抗菌薬処方への影響を評価することであった。予測される直下型ANC（pnANC）を6つのグループ（<0.75×109/l[抗菌薬予防投与中]、0.75-0.99×109/l、1-1.49×109/l、1.5-1.99×109/l、2.0-3.59×109/l、3.6-12×109/l[参考区間]）に層別した。ナディール後の発熱性好中球減少症（FN）および非血液学的毒性（NHT）の発生率を群間で比較した。181頭の犬に586回のpnANCが記録された。ナディア後のFNは4例、ナディア後のNHTは90例であった。pnANC群間で、ナディア後FN（P＝0.063）、ナディア後NHT（P＝0.084）の発生率に有意な差はなかった。抗菌薬の予防投与は、化学療法実施後に8.8％が処方されました。カットオフ値を1.0×109/l未満または1.5×109/l未満とした場合、それぞれ15.3％、25.8％の症例で処方されたことになります。抗菌薬予防のためのANCカットオフ値を0.75×109/l未満とすることは、忍容性が高く、抗菌薬の処方を最小限に抑えることができると考えられる。

本研究では、犬の乳腺を切除して得られたマクロおよびミクロ石灰化のマイクロトモグラフィーによる特性評価を行った。ヒトの乳がんでは、微小石灰化は診断と予後に大きく関係しており、しばしば生検を決定する唯一の要素となっている。イヌの乳腺腫瘍はヒトの乳がんのモデルと考えられているが、この種の乳がんでは石灰化の形態学的特徴はまだ研究されていない。本研究の目的は、犬の乳腺の石灰化の特徴を明らかにすることである。本研究では、33匹の雌犬の切除された乳腺に透視検査を行った。そのうち30個のサンプルでは石灰化の存在が疑われ、これらの部位から複数の生検を行った。生検片はマイクロトモグラフィースキャンを行った。微小石灰化は，ヒトで起こることが知られているように，非腫瘍性の腺組織，良性および悪性の病変に見られた。画像化された石灰化の形態に関する定性的な評価では、多形性や形状など、BI-RADS 2013の分類に基づく乳がんの所見との類似性が認められた。また、体積、表面、表面/体積、SMI、構造体の厚さなどの定量的な形態パラメータについては、巨大石灰化を考慮しても差は見られなかった。しかし、悪性犬の乳腺腫瘍の微小石灰化と他の2つのグループとの間では、これらのパラメータに有意な差が存在したが、非腫瘍性腫瘍と良性腫瘍との間では何の差も認められなかった。この結果は、微小石灰化がヒトにおいて臨床的に重要であることを考慮すると、この自然発生的な動物モデルをヒトの乳がんの研究に使用することを支持するものである。

複製型オンコロイドウイルス（OV）は、頭頸部がんやメラノーマを患うヒトにとって魅力的な、FDAが承認した新しい治療法である。しかし、最近の臨床試験では、いくつかのウイルスが犬や猫に対して安全であることが示されている。犬の肉腫の治療に使用されている具体的なウイルスとしては、改変型犬アデノウイルス2、粘液腫ウイルス、水胞性口内炎ウイルス、レオウイルスなどがある。ワクチン関連肉腫の猫では、ポックスウイルスが術後に注入され、腫瘍の再発率が減少したことが記録されている。現在までのところ、一村一品療法に対する犬や猫の患者の反応率は（人間の場合と同様に）様々である。最適な一村一品の投与方法や投与スケジュールについては、引き続き検討が必要である。獣医の患者における一村一品運動療法の結果を改善する一つの方法は、一村一品運動を他の免疫調節療法と組み合わせて使用することかもしれない。この総説では、一村一品運動とI型インターフェロン経路の阻害剤との併用療法の有用性の可能性について論じている。

MLN4924（pevonedistat）は、強力かつ選択的なNEDD8活性化酵素（NAE）阻害剤である。NEDD8が制御するネジル化システムは、がん細胞の成長、アポトーシス、血管新生、転移などの重要な細胞機能を持つ細胞内タンパク質の分解を制御する役割を担っています。ヒトのメラノーマでは、NAEを阻害すると、DNAの再複製、S期の細胞周期停止、DNA損傷、アポトーシスが誘導される。本研究では、犬の悪性黒色腫の細胞株および患者サンプルに対するMLN4924の抗がん作用を評価し、そのメカニズムを解明することを目的とした。犬の悪性黒色腫細胞株および初代患者サンプルを、様々な濃度のMLN4924またはジメチルスルホキシドとインキュベートした後、細胞生存率を評価した。また、アポトーシス、細胞増殖、老化を測定し、MLN4924による抗腫瘍効果の基礎的なメカニズムを調べました。ヒトのメラノーマで以前に確認された7つの遺伝子の発現を、感受性の高いサンプルと耐性の高いサンプルで比較しました。MLN4924の投与により、犬のメラノーマ細胞株および初代サンプルの生存率が用量および時間依存的に有意に低下した。MLN4924は、DNAの再複製や細胞の老化を誘導することにより、細胞のアポトーシスを促進し、細胞の成長を抑制した。大多数の犬のメラノーマサンプルはナノモル領域で感受性を示したが、一部のサンプルは治療に対して抵抗性を示した。P21レベルの変調は、犬のメラノーマ細胞の感受性と相関していた。これらの結果は、MLN4924を犬のメラノーマの治療薬としてさらに検討することを正当化するものであった。

犬の脾臓血管肉腫（HSA）の治療には、脾臓摘出後に補助化学療法を行うことが一般的に行われているが、治療プロトコールの違いによって同等の効果が得られるかどうかは不明である。このレトロスペクティブな研究の目的は、初回のアジュバントアンスラサイクリン（AC）またはメトロノミック（MC）ベースの化学療法プロトコルのいずれかで治療されたステージIおよびIIの脾臓HSAの犬の転帰を、進行までの期間（TTP）および生存期間（MST）の中央値を比較することによって評価することである。9施設の医療記録を検索し、I期およびII期の脾臓HSAと診断され、脾臓摘出術後にACまたはMCベースのプロトコールによる補助療法を受けた犬を対象とした。ACの後にMCで治療された患者は、追加グループ（AMC）に含まれた。対象となった犬は93頭。AC群50頭、AMC群23頭、MC群20頭の計93頭を対象とした。全体のMSTは200日（範囲47～3352）、全体のTTP中央値は185日（範囲37～1236）であった。ステージIの犬のTTP中央値は、ステージIIの犬に比べて有意に長かった（それぞれ338日 vs 151日、P = 0.028）。治療法の種類で調整すると、MSTはAC群で154日（範囲47～3352日）、AMC群で338日（範囲79～1623日）、MC群で225日（範囲57～911日）であった。MSTおよびTTPの中央値については、治療群間で統計的に有意な差は認められませんでした。本研究では、犬の脾臓HSAにおけるアジュバントMCは、他の治療プロトコールと比較して、同様の結果をもたらす可能性が示唆された。これらの知見を確認するためには、さらなる研究が必要である。

KITは、発がんに関与するチロシンキナーゼ受容体である。ヒトの様々な腫瘍や犬の血管肉腫（HSA）では、c-kitのエクソン9に4つのアミノ酸（GNSK）が存在するか否かで異なる2つの代替スプライシングされた転写産物が確認されている。しかし、これらのアイソフォームの生物学的機能や臨床的意義は、犬の腫瘍ではまだ解明されていない。今回の研究では、発現プロファイルを検証し、最終的に犬の乳腺腫瘍（CMT）の臨床病理学的因子とc-kitアイソフォームレベルの相関を評価することを目的とした。健常対照犬の正常乳腺（NMG）、CMT、良性および悪性CMT、HSAの犬から得られた196のサンプルにおけるc-kitアイソフォームの発現プロファイルを、ポリメラーゼ連鎖反応（PCR）により決定し、リアルタイムPCRにより定量化した。NMGでは2つのアイソフォームの発現量は同等であったが、GNSK-/GNSK+比は7.44倍、8.33倍と急激に増加し、良性および悪性CMTではそれぞれGNSK-アイソフォームが豊富であることがわかった。しかし、悪性度の高いCMT（mCMT）や転移性CMTの犬では、悪性度の低いCMTや非転移性CMTの犬に比べて、GNSK-の発現が有意に減少していた。さらに、GNSK-/GNSK+比が低いmCMTの犬は、高いmCMTの犬に比べて、生存期間の中央値が短かった（899日対1534日）。結論として、2種類のc-kitアイソフォームは、良性・悪性を問わず、HSAとCMTにおいて大きなばらつきを持ってユビキタスに発現している。GNSK-/GNSK+比は、mCMTsを持つ犬の予後の指標となりうる。

クラスターリン（CLU）は、アポリポ蛋白質Jとしても知られ、広く発現しているヘテロ二量体の糖蛋白質であり、腫瘍形成、アポトーシス、免疫調節に重要な役割を果たしている。ヒトでは、CLUの発現は未分化大細胞リンパ腫およびホジキンリンパ腫と関連している。本研究では、ウエスタンブロットと酵素結合免疫吸着法（ELISA）を用いて、多中心性リンパ腫（MLSA）の犬の血清CLU濃度を健常対照犬と比較した。ウェスタンブロット法により、犬血清中に予測された分子量のCLUが存在することが確認され、検出された相対レベルはELISA法で検出されたレベルと相関があった。ELISA法によるCLUレベルの分析では、MLSAの治療を受けていない犬は、健康なコントロールと比較して、血清中のCLUレベルが有意に（P < 0.001）低かった。しかし、治療前のMLSA犬と完全寛解中のMLSA犬の間には有意な差はなかった。血清CLU濃度には大きなばらつきがあるため、MLSAの単一のバイオマーカー候補としては限界があるかもしれないが、血清CLU濃度の予後予測値はまだ評価されていない。

モノカルボン酸トランスポーター（MCT）は、腫瘍の微小環境における代謝物の輸送を制御することで、腫瘍の成長を支えている。ヒトの頭頸部扁平上皮癌（HNSCC）患者では、MCT1またはMCT4の高発現が予後不良と相関している。近年、これらのトランスポーターを標的とした薬剤が開発され、HNSCCの有効な治療戦略となることが期待されています。猫の口腔扁平上皮癌（OSCC）は、進行または再発したHNSCCに類似した攻撃的で治療抵抗性の悪性腫瘍である。本研究の目的は、猫の口腔癌に対する新たな治療法として、以前から特徴づけられていたMCT1とMCT4の二重阻害剤MD-1のOSCCにおける効果を調査することであった。また、ネコのOSCCが、ヒトのHNSCCを治療するためのMCT阻害剤をさらに開発するための大型動物モデルとしての可能性を見極めようとした。In vitroでは、MD-1はネコOSCCおよびヒトHNSCC細胞株の生存率を低下させ、解糖系およびミトコンドリア代謝を変化させ、白金系化学療法と相乗効果を示した。また、MD-1の投与により、HNSCC細胞では乳酸濃度が上昇したが、ネコOSCC細胞では乳酸濃度の変化が見られず、MCTに依存しない活性があることが示唆された。In vivoでは、MD-1は皮下異種移植モデルにおいて腫瘍の成長を有意に抑制し、ネコOSCCの同所性モデルにおいて全生存期間を延長した。今回の結果は、MD-1がネコの口腔がんの治療に有効な治療法となる可能性を示している。また、今回の結果は、MCT阻害剤の開発や将来的にヒトのHNSCCを対象とした臨床研究を行うための大型動物モデルとして、ネコOSCCのさらなる研究を支持するものである。