組織学的な悪性度分類は、犬の皮膚肥満細胞腫（MCT）の予後の要となっているが、それぞれの腫瘍の異なる生物学的挙動のために、しばしば補完的なマーカーの使用が必要となる。予後因子として多くの免疫組織化学的マーカーが提案されているが、現在のところ日常的な診断に適用されているものは少ない。このシステマティックレビューとメタアナリシスは、犬の皮膚MCTに対してどの免疫組織化学的マーカーが検証可能な予後の価値を持つかを確立するためにデザインされた。5つのデータベースをブール検索した結果、スクリーニングのために200の論文が特定され、そのうち73がフルテキスト評価のために選択され、24が最終的にシステマティックレビューに含まれた。その後のメタアナリシスではオッズ比（OR）が要約指標として採用されたが、免疫マーカーであるKi-67（9）、KIT（5）、BAX（2）に関連する15の論文のみがORの値を提供したか、この統計を計算するのに十分なデータを提供した。メタアナリシスの結果、Ki-67またはBAXの発現が高く、KITの免疫発現が異常な犬の皮膚MCTでは、死亡の確率が高く、それぞれのOR値は11.2（95% CI 6.3-20.0; p < 0.01）、9.9（95% CI 1.3-73.6; p = 0.03）、4.1（95% CI 1.1-15.3; p = 0.03）であった。KIT、Ki67、BAXは犬のMCTの適切な予後因子であるにもかかわらず、この研究では、多くの出版物に重要な臨床的・統計的データがないことが強調され、いくつかの潜在的に価値のある免疫組織化学的マーカーのメタ分析を完了することができませんでした。

「初期奏効率が高いにもかかわらず、B細胞リンパ腫の犬の一部は、CHOPベースの化学療法への反応性が低く、生存期間が短い。結節性B細胞リンパ腫の犬1404頭を対象に、第1化学療法サイクル中の個々の薬剤に対する反応に基づいて変更された反応ベースCHOP（RBCHOP）プロトコルで治療した。ビンクリスチンとシクロホスファミドによる治療後、3週目に完全奏効（CR）または部分奏効（PR）が得られた犬には、ビンクリスチン、シクロホスファミド、ドキソルビシンを順次投与するRBCHOP1（n＝72）が適用された。3週目に検出可能な反応が得られなかった犬は、ドキソルビシンを投与してCRまたはPRになった後、RBCHOP2（n＝14）を受けた。この方法では、ドキソルビシンを4回連続投与した後、ビンクリスチンとシクロホスファミドを投与した。3週目に奏効せず、5週目の評価でもドキソルビシンに反応しなかった犬には、レスキュー化学療法（RBCHOP3、n=18）が行われた。無増悪生存期間（PFS）と全生存期間（OST）の中央値は、RBCHOP 1（PFS 210日、OST 354日）とRBCHOP 2（PFS 220日、OST 456日）では同程度であったが、RBCHOP 3（PFS 34日、OST 80.5日、P < 0.001）では有意に短かった。しかし、RBCHOP 2とRBCHOP 3の犬では、診断時にリンパ球増加が認められる確率が高かった（それぞれP = 0.02、0.04）。第1サイクルでの反応に基づいてプロトコルを変更した結果、以前に発表されたCHOPの亜種と同様の毒性プロファイルと結果が得られ、第1治療サイクルで反応しなかった犬の予後は依然として不良であった。

最近の文献によると、犬のリンパ腫を分類するための信頼できるツールとして、フローサイトメトリーによるKi-67の測定と免疫表現型の組み合わせが提案されている。組織学的サンプルを用いた免疫組織化学(IHC)は、Ki-67指数を評価するゴールドスタンダードな手法である。IHCとFCMによるKi-67指数の一致については、これまで調査されていない。本研究の目的は，Ki-67発現/指数の評価におけるIHCとFCMの一致を調査し，FCMが犬のリンパ腫における増殖活性の推定のための非侵襲的な代替法として役立つかどうかを評価することであった。診断的リンパ節切除術を受けた前治療歴のない犬のリンパ腫の犬を前向きに登録した。Ki-67の発現/指数をFCMとIHCで評価し、陽性細胞の割合で表した。病理組織学的に分類された39頭の犬が、組み入れ基準に合致した。いずれの方法でも、Ki-67の発現/指数は中/高悪性度リンパ腫で高かった。Spearmanの相関係数はρ = 0.57; (95% CI0.33-0.75)で、中程度の相関があることが示唆された。Bland-Altmanプロットでは、負の定数バイアスは-3.55（95％CI：-10.52〜3.42）、一致の限界は-45.71〜38.61であった。本研究では、FCMとIHCで評価したKi-67発現/指数の値は、信頼区間が広いものの、一致していることが確認された。しかし、一部の症例では不一致が見られた。可能性としては、IHCのKi-67指数はスライドの最も増殖している部分で決定されるため、サンプリングバイアスが生じる可能性があるが、FCMは細胞懸濁液中のより多くの細胞を評価する。この現象を調べるためには、さらなる研究が必要である。

犬の消化管肉腫は、平滑筋肉腫（LMSA）、消化管間質性腫瘍（GIST）、その他の稀な肉腫を含む腫瘍群であり、全消化管腫瘍の約10～30％を占めている。本研究は、予後を予測する因子を特定するために、組織学的特徴と臨床的挙動を特徴づけることを目的としている。外科的治療を受けた消化管肉腫の単一施設のデータベースを検索した結果、組織学的分析に十分な組織が残っている47例と、臨床的転帰の分析に利用できる42例が得られた。腫瘍は、分裂数、壊死、出血、炎症について前向きに評価され、平滑筋アクチン、c-KIT、DOG-1の免疫組織化学的（IHC）染色によって分類された。IHC分析の結果、32の腫瘍がGIST、14の腫瘍がLMSA、1の腫瘍が特記すべきでない肉腫とされた。GISTとLMSAの両方で、全生存期間（MST）の中央値は1024日（範囲31～1456）で、腫瘍の種類によって統計的な差はありませんでした（p = 0.92）。本研究におけるGISTの全転移率は32.1％（n＝9）であり、LMSAの15.3％（n＝2、p＝0.45）と比較して有意差はなかった。多変量解析では、GIST患者の有糸分裂数が9以下であることと、すべての腫瘍タイプで外科的に完全に切除されていることが、MSTの改善と相関していた。GIST患者では、c-KIT染色の強度も生存期間と正の相関があり、染色が弱い症例ではMSTが250日、c-KIT染色が中程度または強い症例ではMSTが1418日であった（p = 0.005）

我々は、NK細胞の新生物を持つ犬から得たCNK-89と呼ばれる犬のナチュラルキラー（NK）タイプの細胞株を樹立した。イムノフェノタイピング解析では、CD5、CD8、CD45、CD56、CD79a、NKp46が陽性で、CD3、CD4、CD14、CD20、CD21、CD34、Thy1、IgG、IgM、MHCIIは陰性であった。ポリメラーゼ連鎖反応解析では、CD56、NKG2D、NKp30、NKp44、NKp46、パーフォリンの存在が確認されたが、CD16、Ly49、グランザイムBのmRNAは存在しなかった。CNK-89細胞をIL-2で処理しても、活性化受容体の発現、TNFαおよびIFNγの分泌、細胞傷害活性に変化はなかったが、IL-12を単独で、あるいはIL-15、IL-18、IL-21と組み合わせて処理すると、グランザイムBおよびCD16のmRNA、IFNγの分泌、細胞傷害特性の増加が見られた。

犬の乳腺癌（CMC）は、犬の大きな健康上の脅威の一つである。オンコロイドウイルス療法は、イヌだけでなくヒトのがん患者に対しても、非病原性の複製ウイルスを用いて治療する有望な戦略である。ここでは、5種類のCMCと1種類の非腫瘍性細胞株を用いて、GFPを発現する1種類のレンチジェニックな非ライシス性ニューカッスル病ウイルス（NDV）LaSota株（NDV-GFP）の抗腫瘍活性を、細胞生存率、細胞死、選択性指数、形態、グローバルおよび標的遺伝子の発現解析に関して評価した。選択性指数から明らかなように、すべてのCMC細胞株は、非腫瘍細胞と比較してNDV-GFPに対する感受性が高かった（～3.1×～78.7×）。さらに、NDV-GFPのオンコロジー効果は、より悪性度の高いCMC細胞でより顕著であった。また、IFN経路の発現とNDVへの感受性には逆の関連が認められた。NDV-GFP感受性細胞で発現が低下した遺伝子は、インターフェロンや免疫系の経路による抗ウイルス機構に機能的に濃縮されており、これらの機構がNDVによるオンコリシスに最も顕著であることが示された。我々の知る限り、これは犬の乳がん細胞におけるNDV株によるオンコリシスの初めての記述である。我々はまた、これらの癌細胞においてNDV感受性に関連する特定の分子経路を明らかにし、より悪性のCMCsに対してNDVを治療標的として使用する可能性を開いた。これらの結果から、オンコロイド型NDVを用いた研究がさらに進み、特に犬での有効性を高めるための遺伝子編集を検討する必要があると考えられる。

センチネルリンパ節（SLN）の評価は正確な癌の病期診断に重要である。水性造影剤を用いたコンピュータ断層撮影（CT）によるリンパ管造影は，イヌのSLNを同定するための実現可能な技術である。多くの研究では90％前後の成功率が報告されているが、60％という低い成功率も報告されている。成功率が低い理由の一つとして、使用する様々な薬剤の粘度が通常のリンパの粘度と異なることが考えられる。本研究の目的は、SLN同定のためのCTリンパ管造影に使用する粘度の異なる造影剤を評価し、マッサージが造影剤の流量に与える影響を明らかにすることであった。仮説は、低粘度の造影剤は高粘度の造影剤に比べてSLNの識別に成功する割合が高く、識別までの時間が短いというもので、マッサージによって造影剤の流量が増加すると考えられた。犬に麻酔をかけ、粘度の異なる4種類の造影剤を用いて、無作為化クロスオーバーデザインでCTリンパ管造影を行った。試験日2日目に両側の背腹に注射を行い、膝窩リンパ節の造影剤の取り込みを評価した。SLN同定の成功率およびSLN同定までの時間は，4剤間で有意な差はなかった。注射部位をマッサージすることで、リンパ管内の造影剤の流入速度が増加した。これらの結果から、ある造影剤を他の造影剤と比較して特別に推奨することはできない。犬で水性造影剤を用いたCTリンパ管造影を行う際には、リンパの流れを改善するためにマッサージを行うことが推奨される。

このレトロスペクティブコホート研究の目的は、脾臓摘出術を受けた犬の集団における胸骨リンパ節腫脹の有病率を調べ、その有病率が脾臓の悪性腫瘍と関連するかどうかを評価することである。さらに、血管肉腫（HSA）と診断された犬において、手術時に胸骨リンパ節腫脹がある場合とない場合で生存率が異なるかどうかを調査した。2013年から2016年に脾臓摘出術を受けた犬のデジタルX線写真と医療記録をレトロスペクティブにレビューした。調査期間中に159頭の犬が脾臓摘出術を受けた。胸骨リンパ節腫脹の全体的な有病率は12.8％であった。血管肉腫の犬の胸骨リンパ節症の有病率は16.2%(12/74)、その他の悪性腫瘍は15.8%(3/19)、良性の経過では9.8%(10/102)であった。胸骨リンパ節腫脹と血腹症（p＝0.20）、胸骨リンパ節腫脹と新生物の存在（p＝0.37）との間に有意な関連はなかった。胸骨リンパ節腫脹の有無による全犬の生存確率に有意な差はなかった（p＝0.073）。しかし、HSAの74頭（p＝0.036）と他の脾臓悪性腫瘍の19頭（p＝0.039）では、胸骨リンパ節腫脹が生存率低下と関連していた。胸骨リンパ節腫脹の存在は、血腹を呈している犬に見られる場合、予後を悪くする指標と考えるべきではない。初診時の胸骨リンパ節腫脹の存在は、脾臓疾患を持つすべての犬の生存期間とは有意に関連していなかったが、脾臓悪性腫瘍を持つ犬の生存に関連する予測値を持つ可能性がある。

腫瘍の病期は犬の悪性頭頸部腫瘍（MHNT）の予後を左右する指標である。しかし、臨床的に明らかなリンパ節病変がない場合（cN0頸部）のリンパ節病期についてはコンセンサスが得られていない。この前向き観察研究の目的は、センチネルリンパ節生検（SLNB）における放射性医薬品と青色色素の診断精度を決定すること、センチネルリンパ節（SLN）と臨床的に予想される所属リンパ節（RLN）の対応を評価すること、そしてMHNTで頸部がcN0の犬において、この手術が病期決定に与える影響を評価することである。MHNTで頸部がcN0の犬23頭を対象に、術前のリンパシンチグラフィーと術中のガンマプローブと青色色素を用いて、腫瘍の切除とSLNBを行った。診断性能と検出率を算出した。SLNとRLNの対応関係、切除したリンパ節の数、SLNの病理組織学的状態、手術に関連する合併症を記録した。マッピング法は19/23頭の犬で少なくとも1つのSLNを同定し、検出率は83％であった。SLNがRLNと一致しなかった犬は52%であった。61%の犬で複数のリンパ節が摘出された。病理組織学的には8頭（42％）の犬がSLN+であり、そのうち4頭はRLNと異なっていた。軽度の自己限定的な合併症が5頭（22％）に発生しただけであった。放射性医薬品と青色染料によるガイドは、MHNTとcN0の犬のSLNBに正確（感度88.9％、特異度100％）であり、予測できないSLNや複数のSLNを最小限の病的状態で切除することができた。MHNTの管理にSLNBを取り入れることは、リンパの流れが予測できないことから、cN0の頸部を正しくステージングするために望ましい。

全肺照射（WLI）は、骨肉腫の補助療法としてヒトで成功している。本研究の目的は、虫垂骨肉腫の犬におけるWLIの実現可能性と安全性を説明することである。この前向き臨床試験には、切断とカルボプラチン4回の投与を無事に終え、肉眼的な転移の証拠がない虫垂骨肉腫のクライアント所有の犬12匹が登録された。1日1回、1.75Gyを10回に分けて、肺を含む計画標的体積に投与した。全体的に、WLIはこれらの患者の忍容性が高かった。肺炎や肺線維症の症状が出た犬はいなかった。放射線治療中に評価された造血器の毒性は軽度であった。WLI治療を受けた犬の無病期間の中央値は、歴史的な対照犬のDFI中央値と有意な差はなかった（WLI治療を受けた犬の376日対対照犬の304.5日、p = 0.5461）。今回の試験では有意な転帰の改善は認められなかったが、WLIは犬において安全であると考えられ、その有効性と毒性を明らかにするためにさらなる調査が必要である。