“マイクロRNA-214（miR-214）は、極めて重要な腫瘍抑制性のmiRNAであり、犬の血管肉腫（HSA）細胞ではダウンレギュレートされている。これらの腫瘍抑制性miRNAは治療薬として期待されているが、RNaseが豊富な微小環境に弱く、in vivoでのトランスフェクション率が低いため、その臨床効果は限定される可能性がある。我々は、細胞毒性、RNase耐性、細胞内/細胞上のmiR-214の量を強化した合成miR-214を開発した。これらの合成miR-214は，野生型の成熟miR-214の配列をさまざまな化学修飾（4′-アミノエチル-2′-フルオロ，2′-O-メチル，ホスホロチオエート，オリゴスペルミン修飾など）を施して合成した。合成miR-214（miR-214 5AE）をHSA細胞にトランスフェクションしたところ、有意な成長抑制効果が認められ、最も強いアポトーシス反応が誘導された。合成miR-214（miR-214 5AE, miR-214 10AE, miR-214 OS）は、ウシ胎児血清中では成熟miR-214よりもはるかに安定していた。成熟したmiR-214と同様に、5AEとOSはHSA細胞のCOP1の発現レベルを抑制した。細胞内の合成miR-214の量は、成熟miR-214よりも多かった。結論として、我々は臨床応用可能な合成miR-214 5AEを開発し、成熟したmiR-214が介在する場合と同様にCOP1タンパク質の発現を制御することができた。さらに、miR-214 5AEは、成熟型miR-214よりも優れた細胞毒性、ヌクレアーゼ耐性、トランスフェクション率を付与する。このように、miR-214 5AEは、HSAの予後を改善する新しいmiRNAベースの化学療法剤となる可能性がある。今後、犬のHSAに対するin vivoでの効果を検証する必要がある。
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