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Sunday, April 20, 2025
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プロテオミクス手法を用いた犬の乳腺腫瘍細胞のバイオマーカー候補の同定。二次元電気泳動法を用いた質量分析による腫瘍細胞と正常乳腺上皮細胞のタンパク質プロファイルの違い

犬の乳腺腫瘍(CMT)は、無傷の雌犬では高い確率で再発・転移する侵襲性腫瘍とされている。したがって、腫瘍の診断は、腫瘍の進行を予測し監視する上で重要なステップである。本研究では、プロテオミクスの手法を用いて、CMTにおけるタンパク質の発現を明らかにすることを目的とした。良性混合腫瘍、単純癌、複雑癌、正常乳腺の初代細胞培養を行い、二次元電気泳動(2DE)を実施した。各サンプルタイプの異なるスポットを収集し,液体クロマトグラフィー-タンデム質量分析(LC-MS/MS)を用いて同定した。その結果、良性混合腫瘍細胞と複合癌細胞では、サイトケラチン5(CK5)とトランスケトラーゼ(TKT)が同定された。一方、単純癌細胞では、サイトケラチン18(CK18)とピルビン酸キナーゼPKMが同定された。さらに、α-2-HS-糖タンパク質腫瘍抗原は、複雑な癌細胞に特異的に同定された。また、良性細胞では、ATP依存性の6-phosphofructokinase platelet typeとelongation factor 2タンパク質が観察された。結論として、本研究で発現した全てのタンパク質は、健常な乳腺上皮細胞とは異なる発現として作用していることが認められました。今回の研究では、CMTの診断バイオマーカー研究に有用と思われる発現タンパク質が同定されたことが期待される。

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