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Wednesday, December 25, 2024
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犬の口腔内メラノーマにおけるCyclin D1免疫組織化学的発現と体細胞突然変異

犬の口腔内メラノーマ(COM)は、犬の口腔内に発生する最も頻度の高い腫瘍である。ヒトの非紫外線性メラノーマでは、Cyclin D1をコードする遺伝子であるCCND1のコピー数増加と増幅が最も頻繁に見られる染色体異常である。COMの28例がパラフィンブロックのアーカイブから取り出された。合計4μmの厚さの切片を、ヒトCyclin D1とKi-67に対する抗体で免疫染色した。サイクリンD1とKi-67の発現は、2つのカウント方法で評価した。ホルマリン固定パラフィン包埋ブロックの20μm厚の切片からDNAを抽出した。病理組織とその周辺の健常組織は別々に抽出した。サイクリンD1の免疫標識は69%(18/26)、Ki-67は88.5%(23/26)の症例で検出されました。統計解析の結果、Cyclin D1(r = 0.54; P = 0.004)とKi-67(r = 0.56; P = 0.003)の2つの計数法の間に相関関係が認められた。両抗体で検出された16/26例のKi-67とCyclin D1指標の間には相関関係が認められ(r = 0.7947; P = 0.0002)、Cyclin D1指標が予後マーカーとして使用できる可能性が示唆された。CCND1のコーディング配列をポリメラーゼ連鎖反応で解析したところ、7つのサンプルに9つの体細胞変異が存在し、同義コドン、ミスセンスコドン、ストップコドンが生じていた。いずれの一塩基多型も再発していなかったことから、Cyclin D1の過剰発現は、CCND1の上流領域の変化や、本研究で用いた方法では検出できない他の遺伝子異常の結果である可能性が示唆された。今後、Cyclin D1指標が予後の指標として使用できるかどうかを検証し、COMsにおけるCyclin D1過剰発現の原因となる分子イベントを明らかにする必要がある。

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