犬のB細胞リンパ腫は、獣医学において最も一般的な造血器系新生物の一つであり、ヒトのびまん性大細胞型B細胞リンパ腫の適切なモデルと考えられている。多剤併用化学療法からなる標準的な治療はほとんどの症例で有効であるが、再発や薬剤耐性のために治療が困難な場合が多い。CD19特異的なキメラ抗原受容体を発現するように遺伝子改変された自己T細胞（CD19 CAR-T細胞）の養子縁組は、ヒトB細胞性悪性腫瘍に高い効果を示すことが示されている。しかし、臨床的に利用可能な犬のCAR-T細胞療法はありません。我々は，レトロウイルスによる遺伝子導入により，犬の第2世代および第3世代のCAR-T細胞を作製した．犬のCAR-T細胞に有効なウイルス導入プロトコルと好ましい培養条件を調べるために最適化を行った。レトロネクチン結合ウイルス感染法では、70％以上の導入効率が得られた。培養条件がCAR-T細胞の表現型に与える影響を表面マーカーの発現で評価した。CD20 CAR-transduced細胞を培養した標的細胞のin vitro細胞毒性アッセイでは、CD20 CAR-T細胞はCD20を発現した犬B細胞リンパ腫細胞および犬CD20を導入したマウス細胞に対して細胞毒性を示すが、犬CD20を発現していない細胞に対しては効果が認められなかった。本研究により、ウイルスを用いた犬用CAR-T細胞の作製が確立され、犬の養子縁組T細胞療法の理解を深めるための基礎データが得られた。
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